剪股颖属植物遗传分化及系统关系的分子标记研究

剪股颖属植物形态变异大、倍性复杂、种间易于杂交,导致异名多、分类混乱。本研究采用4种分子标记技术,对包括匍茎剪股颖、巨序剪股颖及红顶草在内的7种剪股颖,共58个个体的遗传分化和系统关系进行研究。根据谱带清晰程度及多态性,筛选出9个RAPD引物、2个SSR引物、5个ISSR引物及1个SCAR标记,并建立了最适的PCR反应条件。采用最大简约法和距离法对7种剪股颖植物进行系统树分析,并用靴带检验法计算内部分支的支持率。启发式搜索得到的简约树和由UPGMA方法得到的表征树近乎相同,其中,匍茎剪股颖和红顶草构成单系类群并得到100%的置信支持。红顶草显示了匍茎剪股颖特异性特征谱带,但同时具有不同于匍茎剪股颖的遗传分化,支持将红顶草视为匍茎剪股颖一个变种的观点。对匍茎剪股颖与巨序剪股颖间的遗传分化进行了探讨。     

西藏巨柏种群天然更新与群落特征研究

巨柏(Cupressus gigantea)为雅鲁藏布江地区分布的特有种,属国家一级保护植物。本文通过在米林-朗县雅鲁藏布江河谷13个面积为1 000 m2的巨柏林样地调查资料,按照近河谷和远河谷山坡的地理分布差异,统计分析了巨柏的种群天然更新特征;通过对群落的组成与结构的分析,初步阐述了巨柏群落的物种组成和结构特征。结果表明,雅鲁藏布江巨柏的更新情况比较差,种群年龄结构不稳定,整体上呈现了明显的种群衰退现象。通过种群的年龄结构分析,反映出了巨柏种群的失衡事件主要发生在最近几十年内,即0.6 m高度10 cm树径范围。巨柏林内物种组成结构单一,乔木层为单一巨柏种,灌木层和草本层的优势种数较少。鉴于巨柏种群环境沙化影响加剧、天然更新能力下降等因素,种群的延续面临较大威胁,需进一步加强该种群的保护和研究。     

Meiotic and Isozymic Analyses of Tall Fescue × Giant Fescue Hybrids and Amphiploids1

The meiotic behavior of three tall fescue (Festuca arundinacea, 2n = 6x = 42) genotypes, giant fescue (F. gigantea, 2n = 6x = 42), and their reciprocal F₁ hybrids and C₁, amphiploids was evaluated to determine the parental genomic relationships. Isozyme banding patterns were used to confirm the parental identity of the hybrids and amphiploids. At meta-phase I, the parents had predominantly bivalent pairing. The hybrids had an average of 9.51 I, 16.02 II, 0.12 III, 0.02 IV, and the amphiploids had 2.17 I, 38.82 II, 0.60 III, 0.58 IV, 0.01 V—VIII. The prevalence of bivalent pairing in both hybrids and amphiploids suggested a homoeologous relationship between the six genomes, with four of the six being more closely related. Bivalent pairing in the amphiploids indicated genetic regulation of chromosome pairing. Zymograms were obtained for acid phosphatase (ACPH), alcohol dehydrogenase (ADH), glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), malate dehydrogenase (MDH), 6-phosphogluconate dehydrogenase (6-PGD) and phosphoglucoisomerase (PGI). The three tall fescue and giant fescue parents had different zymograms for ACPH, MDH, 6-PGD and PGI; thus, the tall fescue parents of the hybrids and amphiploids could be determined based on the banding patterns of these four enzymes. Phenotypes were determined for ACPH-1, PGI-2 and 6-PGD-1. ACPH-1 may be used to follow the introgression of giant fescue chromatin into a certain tall fescue genotype.     

巨大口蘑不同年限和部位的红外光谱鉴定

为快速准确地鉴别不同部位和不同采集年限的巨大口蘑,采集88份巨大口蘑样品的傅里叶红外光谱进行分析,建立判别模型,鉴别不同部位、不同采集年限的巨大口蘑。对波段进行筛选,并比较多元散射校正（multiplicative scatter correction,MSC）、标准正态变量（standard normal variate,SNV）、一阶微分（first derivative,FD）、二阶微分（second derivative,SD）等预处理方法对模型的影响。结果表明：巨大口蘑子实体主要含蛋白质、糖类、脂类等物质,在光谱波数为1655 cm－1、1554 cm－1和243 cm－1附近是蛋白质的特征峰,在1410 cm－1、1376 cm－1、1243 cm－1、1160 cm－1和952 cm－1附近有脂肪类物质的特征峰,在 1154 cm－1、901 cm－1、880 cm－1和814 cm－1附近为多糖的特征吸收峰。原始光谱结合标准正态变量校正,在1800～600 cm－1对不同部位的巨大口蘑样品的鉴别正确率为100％;对不同年限巨大口蘑菌柄校正集和预测集分类正确率分别为100％和92．3％;不同采集年限的巨大口蘑菌盖校正集和预测集分类正确率均为100％。     

大花香水月季的授粉率及花粉管生长途径

 研究大花香水月季雌蕊群的授粉率及花粉管生长途径,为其育种应用及资源保护提供依据。显微观察统计大花香水月季花期雌蕊群的授粉效率,荧光显微观察花粉管生长途径。结果表明：花朵萼片平行伸展后120h,柱头授粉率接近100%,单柱头花粉量达最大值为（84.20±5.8）粒;自萼片自然伸展48h时柱头上少量萌发,72h后花粉管伸长至花柱中下部,90h后观察到有花粉管进入子房。大花香水月季单花雄蕊（129±20）枚,雌蕊（30±5）枚,开放持续5～7d;花粉自萌发至花粉管进入胚珠需要30～40h。     

大花香水月季再生体系的初步建立

 以大花香水月季（Rosa odoratavar. gigantea）为材料,研究了影响愈伤组织诱导和分化的因素,包括不同生长调节剂浓度和组合、暗培养时间等。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体,MS为基本培养基,腋芽萌发的最适激素浓度组合为6-BA 1.5mg/L+NAA0.12mg/L;最适诱导愈伤培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L,诱导率为93.33%;最适诱导不定芽培养基为MS+TDZ 3.0mg/L+GA3 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,暗培养15d,再生率为18%。本研究通过间接器官再生途径初步建立的大花香水月季植株再生体系,为利用外源基因对月季进行遗传改良奠定了基础。     

巨紫荆优良新品系实生与嫁接快速繁殖技术

[目的]探讨巨紫荆优良新品系快速繁殖方法。[方法]采用实生繁殖和嫁接技术对巨紫荆优良新品系进行快繁。[结果]沙藏45d的种子发芽最快,出苗率最高,达83.5%,清水浸泡3 d处理的种子发芽最迟,出苗率最低,仅35.4%;春季采用劈接和插皮接,成活率在95%以上;夏季生长期采用＂T＂字形芽接、大方块芽接和带木质芽接,成活率均在98%以上。[结论]嫁接繁殖成活率高于实生繁殖,可作为主要的繁殖方法。     

1株巨大口蘑的鉴定及培养基中无机盐优化

为筛选巨大口蘑菌丝生长的最优培养基,从采集自云南临沧的野生口蘑子实体中分离获得菌株YAASM4295,利用形态学与ITS序列分析的方法对其进行分类学鉴定;并以不同的无机盐为基础,通过单因素试验,各筛选出2种大量元素和微量元素,采用L9(34)正交试验设计,分析4种无机盐及其正交组合对该菌菌丝生长的影响。结果表明,采集到的菌株为巨大口蘑,供试无机盐对其菌丝生长在不同程度上均有促进作用,其中0.1 mg·m L~(-1)MgSO_4、0.1 mg·m L~(-1)K_2HPO_4、0.05 mg·L~(-1)CoCl_2、0.05 mg·L~(-1)Mn Cl_2对该菌生长与生长势的促进作用最大,且与其它处理相比达到了极显著水平。4种无机盐协同作用对该菌菌丝生长影响的大小依次为Mg SO4CoCl_2MnCl_2K2HPO4;最佳组合为0.2 mg·m L~(-1)Mg SO4+0.1 mg·m L~(-1)K_2HPO_4+0.01 mg·L~(-1)MnCl_2+0.01 mg·L~(-1)CoCl_2。综上,该野生巨大口蘑菌株在各无机盐培养基组合之间的菌丝生长速度差异极显著,不同组合间有明显的交互作用,这为其优质栽培提供了理论依据。